2017

Titulo

Implementación de la metodología PCR-SSO con tecnología Luminex en la tipificación de los genes HLA para el trasplante en Cuba

Autores

Nialis Caraballo Rivera , Arturo Chang Monteagudo , Luz Mirella Morera Barrios , Lelyem Marcell Rodríguez , Catalino Ustariz García , Antonio Bencomo Hernández

Resumen


Introducción: La tipificación HLA es la base para establecer la compatibilidad en el trasplante, llevar a cabo investigaciones inmunogenéticas poblacionales y realizar los estudios de HLA y enfermedad. La metodología de PCR con oligonucleótidos específicos de secuencia (SSO), es una metodología para la tipificación HLA rápida y capaz de procesar altos volúmenes de muestras a un costo relativamente bajo.

Objetivo: Implementar la metodología PCR-SSO con tecnología Luminex en la tipificación de los genes HLA para el trasplante en Cuba.

Métodos: Se realizó la implementación de la tecnología PCR-SSO para la tipificación HLA durante abril y mayo del 2017 en el Instituto de Hematología e Inmunología de la Habana. Para el aislamiento de ADN se utilizó el sistema QIAmp DNA en un autómata QIAcube. Como referencia se empleó el PCR con cebadores específicos de secuencia (SSP), y estuches Olerup de baja y alta resolución. Para la tipificación HLA por SSO se utilizaron los estuches LIFECODES HLA y un citómetro de flujo multiparamétrico Luminex.

Resultados: Existió un 100% de concordancia con 40 muestras tipificadas por PCR-SSP de baja resolución para los loci HLA-B, DRB1 y DQB1 y un 97,5% para el locus HLA-A. Se encontró un 100% de concordancia con tres tipificaciones de alta resolución HLA-A-B-C-DRB1-DQB1. En cinco estudios familiares para trasplante de células progenitoras hematopoyéticas se determinaron correctamente los haplotipos HLA. Se realizaron 131 nuevas tipificaciones de receptores renales.

Conclusiones: Se implementó la metodología PCR-SSO con tecnología Luminex en la tipificación de los genes HLA para el trasplante en Cuba.